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pADH147

产品货号:P49400

产品规格:

    少量干粉质粒 大提液体质粒

产品数量:

- 1 +

产品价格:0.00

一键复制产品信息
名称: pADH147
别称: Plasmid#90991
基因长:
质粒宿主: 酵母菌
质粒用途: 基因编辑
片段类型: CRISPR
片段物种:
原核抗性: Amp
筛选标记: NAT
荧光标记:
启动子:
复制子: pUC
拷贝数:
感受态: DH5a
温度: 37度
背景载体:
正向引物:
反向引物:
诱导方式:

1、本平台所有产品仅供科研使用,不能用于临床试验,包括人体口服、注射或者体外用药;
2、小包装质粒以模板价格出售,只保证基因部分测序正确,不保证质粒的表达等实验效果;
3、某些质粒即使是出品公司亦没有完整测过序,如关键部位的序列测序正确,亦认为是正确质粒;
4、小包装质粒产品的售后期为您收到产品之日起3个月,收到质粒后请及时转化操作,过期需重新购买;
5、质粒构建皆收取的是成本费用,所有质粒会分享给其他实验者,保密性质粒请提前告知并缴纳保密费用;
6、因科学研究为探索未知的活动,存在较大不确定性,故在任何情况下淼灵都不承担额外的连带责任;
7、发表[中文论文]请标注:产品名称(产品货号) 由武汉淼灵生物科技有限公司提供;
8、发表[英文论文]请标注:Product Name (Product Item Number) was obtained from MiaoLingBio,China.

操作说明

一、质粒干粉(负20度保存,保质期90天,常温运输)

1、收到干粉质粒后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒;

2、将相应的感受态于冰盒上解冻,取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴 30min;

3、42度热激60s,冰浴2min,加入900μl无抗LB培养基,180rpm震荡培养45min;

4、6000rpm离心3min,留100μl上清重悬,再涂至对应抗性的LB平板上;

5、倒置培养过夜后,如菌落过多则稀释质粒转化,如没有菌落则取10ul质粒转化;

6、挑单菌落至对应抗性的LB液体培养基中过夜震荡培养,根据需要提取质粒。


二、液体质粒(负20度保存,保质期90天,冰袋运输)

1、收到液体质粒后请甩动保存管,让液体质粒不要吸附在管壁上;

2、根据实验需求取适量质粒,其余保存于负20度冰箱。

三、甘油菌种(负80度保存,保质期90天,冰袋运输)

1、收到甘油菌种后请甩动保存管,让菌液不要吸附在管壁上;

2、用接种环在固体平板上四区划线,如有抗性就加对应抗性;

3、恒温培养箱倒置培养12~16h;

4、务必挑取单菌落接种于液体培养基中,如有抗性就加对应抗性;

5、摇床震荡培养过夜,根据实验需要培养菌种。

一键复制序列(有部分质粒是非全长序列)
1

TGTCATGCCA

TCCGTAAGAT

GCTTTTCTGT

GACTGGTGAG

TACTCAACCA

AGTCATTCTG

61

AGAATAGTGT

ATGCGGCGAC

CGAGTTGCTC

TTGCCCGGCG

TCAATACGGG

ATAATACCGC

121

GCCACATAGC

AGAACTTTAA

AAGTGCTCAT

CATTGGAAAA

CGTTCTTCGG

GGCGAAAACT

181

CTCAAGGATC

TTACCGCTGT

TGAGATCCAG

TTCGATGTAA

CCCACTCGTG

CACCCAACTG

241

ATCTTCAGCA

TCTTTTACTT

TCACCAGCGT

TTCTGGGTGA

GCAAAAACAG

GAAGGCAAAA

301

TGCCGCAAAA

AAGGGAATAA

GGGCGACACG

GAAATGTTGA

ATACTCATAC

TCTTCCTTTT

361

TCAATATTAT

TGAAGCATTT

ATCAGGGTTA

TTGTCTCATG

AGCGGATACA

TATTTGAATG

421

TATTTAGAAA

AATAAACAAA

TAGGGGTTCC

GCGCACATTT

CCCCGAAAAG

TGCCACCTGA

481

CGTCTAAGAA

ACCATTATTA

TCATGACATT

AACCTATAAA

AATAGGCGTA

TCACGAGGCC

541

CTTTGACGGC

ACGGCCACGC

GTTTAAACCG

CCGTTTTAGA

GCTAGAAATA

GCAAGTTAAA

601

ATAAGGCTAG

TCCGTTATCA

ACTTGAAAAA

GTGGCACCGA

GTCGGTGCTT

TTTTTCTCGA

661

GTTTTTTTAT

CGAGGAAGTT

CCTATACTTT

CTAGAGAATA

GGAACTTCCC

ACCTTGATGT

721

ACACACCTTT

AAAGTCAATA

GGCATTCTCG

TTTGTAATTC

CTTGACACAC

ATATCCATTA

781

ACTTTAAACC

ATCTTCGACC

GTCATGTCCT

TTCTATAATG

TTTATCTAAC

AAAGATGTTG

841

TGTAAAATGC

AGCGTAGCCA

TGAGCACCAT

AAGGGAGTTC

AACTTGTGTA

CCCAAATAAT

901

CTATCCAATT

CAACGATGGC

TCATTTTTCT

TTACATCATA

TCCTCCAATT

AAACAGTTCA

961

CCTGGTACGG

TTTTCTAGAT

CTAAGGGAAC

TGGCCAATTG

GTTTCTCACA

AACGAGGCTG

1021

TTGCCTTTGG

AGATAACTCA

ATGTCATTTT

CTCTCATCGA

GTACAATTGA

ATGTTTGCTT

1081

GAACATACTC

GGCAAACTGA

ACCGTATCAC

CAGCTTCACC

AGTGTATGCT

ATTAAGTTGT

1141

GTGCATTTAA

ATGTCTTGTT

TTATCATCTG

TATCCTTTAA

AATTGAAATA

CCTCTTGTGG

1201

CAGCTTTACG

GTGTTTAAAC

CCCAGCGCCT

GGCGGGCGCT

CACAATTCCA

CACAACATAC

1261

GAGCCGGAAG

CATAAAGTGT

AAAGCCTGGG

GTGCCTAATG

AGTGAGCTAA

CTCACATTAA

1321

TTGCGTTGCG

CTCACTGCCC

GCTTTCCAGT

CGGGAAACCT

GTCGTGCCAG

CTGCATTAAT

1381

GAATCGGCCA

ACGCGCGGGG

AGAGGCGGTT

TGCGTATTGG

GCGCTCTTCC

GCTTCCTCGC

1441

TCACTGACTC

GCTGCGCTCG

GTCGTTCGGC

TGCGGCGAGC

GGTATCAGCT

CACTCAAAGG

1501

CGGTAATACG

GTTATCCACA

GAATCAGGGG

ATAACGCAGG

AAAGAACATG

TGAGCAAAAG

1561

GCCAGCAAAA

GGCCAGGAAC

CGTAAAAAGG

CCGCGTTGCT

GGCGTTTTTC

CATAGGCTCC

1621

GCCCCCCTGA

CGAGCATCAC

AAAAATCGAC

GCTCAAGTCA

GAGGTGGCGA

AACCCGACAG

1681

GACTATAAAG

ATACCAGGCG

TTTCCCCCTG

GAAGCTCCCT

CGTGCGCTCT

CCTGTTCCGA

1741

CCCTGCCGCT

TACCGGATAC

CTGTCCGCCT

TTCTCCCTTC

GGGAAGCGTG

GCGCTTTCTC

1801

ATAGCTCACG

CTGTAGGTAT

CTCAGTTCGG

TGTAGGTCGT

TCGCTCCAAG

CTGGGCTGTG

1861

TGCACGAACC

CCCCGTTCAG

CCCGACCGCT

GCGCCTTATC

CGGTAACTAT

CGTCTTGAGT

1921

CCAACCCGGT

AAGACACGAC

TTATCGCCAC

TGGCAGCAGC

CACTGGTAAC

AGGATTAGCA

1981

GAGCGAGGTA

TGTAGGCGGT

GCTACAGAGT

TCTTGAAGTG

GTGGCCTAAC

TACGGCTACA

2041

CTAGAAGAAC

AGTATTTGGT

ATCTGCGCTC

TGCTGAAGCC

AGTTACCTTC

GGAAAAAGAG

2101

TTGGTAGCTC

TTGATCCGGC

AAACAAACCA

CCGCTGGTAG

CGGTGGTTTT

TTTGTTTGCA

2161

AGCAGCAGAT

TACGCGCAGA

AAAAAAGGAT

CTCAAGAAGA

TCCTTTGATC

TTTTCTACGG

2221

GGTCTGACGC

TCAGTGGAAC

GAAAACTCAC

GTTAAGGGAT

TTTGGTCATG

AGATTATCAA

2281

AAAGGATCTT

CACCTAGATC

CTTTTAAATT

AAAAATGAAG

TTTTAAATCA

ATCTAAAGTA

2341

TATATGAGTA

AACTTGGTCT

GACAGTTACC

AATGCTTGAT

CAGTGAGGCA

CCTATCTCAG

2401

CGATCTGTCT

ATTTCGTTCA

TCCATAGTTG

CCTGACTCCC

CGTCGTGTAG

ATAACTACGA

2461

TACGGGAGGG

CTTACCATCT

GGCCCCAGTG

CTGCAATGAT

ACCGCGAGAC

CCACGCTCAC

2521

CGGCTCCAGA

TTTATCAGCA

ATAAACCAGC

CAGCCGGAAG

GGCCGAGCGC

AGAAGTGGTC

2581

CTGCAACTTT

ATCCGCCTCC

ATCCAGTCTA

TTAATTGTTG

CCGGGAAGCT

AGAGTAAGTA

2641

GTTCGCCAGT

TAATAGTTTG

CGCAACGTTG

TTGCCATTGC

TACAGGCATC

GTGGTGTCAC

2701

GCTCGTCGTT

TGGTATGGCT

TCATTCAGCT

CCGGTTCCCA

ACGATCAAGG

CGAGTTACAT

2761

GATCCCCCAT

GTTGTGCAAA

AAAGCGGTTA

GCTCCTTCGG

TCCTCCGATC

GTTGTCAGAA

2821

GTAAGTTGGC

CGCAGTGTTA

TCACTCATGG

TTATGGCAGC

ACTGCATAAT

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