淼灵质粒使用说明书

      产品规格0.5~2μg质粒干粉,保证能转化出来,不保证具体含量,请务必转化提取后再使用。
      保质期限:90天,请尽快转化。
     
保存温:一般在-20℃,置于-80℃保存时间更长。
      运输方式:常温运输,1周内。
      注意事项:转化前请准确查找该质粒相应的抗性、感受态和培养温度。(请向区域负责人QQ索要质粒信息目录)
      使用说明
   
         1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
            2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
            3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
            4、42℃热激90s,再冰浴2min;
            5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
            6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
            7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
            8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
            9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。

注意:1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
            2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。

下面是成功转化的参考图片: