用途一：基因工程载体

质粒是基因工程中常用的载体，可将目标基因片段重组到质粒中，构成重组基因或重组体。然后通过微生物学的转化技术，将重组体转入受体细胞中，使目标基因在受体菌中得以繁殖或表达，从而改变寄主细胞原有的性状或产生新的物质。

用途二：编码生物学性状

质粒能够编码某些生物学性状，如细菌耐药性、性菌毛、细菌素和毒素等。

用途三：疾病诊断和治疗

质粒可用于疾病的诊断和治疗。例如，质粒可以携带报告基因，用于检测疾病相关的基因表达或蛋白质活性；质粒还可以用于基因治疗，将治疗性基因递送到患者体内，以纠正或补偿基因缺陷。

用途四：疫苗研发

质粒可以作为疫苗的载体，将抗原基因插入质粒中，制备成基因疫苗。基因疫苗具有安全性高、稳定性好、易于生产等优点，是疫苗研发的重要方向之一。

用途五：疫苗研发药物筛选和开发

质粒可以用于药物筛选和开发。例如，通过构建质粒文库，可以筛选出与药物靶点相互作用的蛋白质或基因；质粒还可以用于药物输送，将药物包裹在质粒中，提高药物的靶向性和疗效。

总结

质粒是一种很重要的生物工程载体，在生物医学领域具有广泛的应用前景，为疾病的诊断、治疗和预防提供了新的思路和方法。

质粒的用途讲完了，那我们怎么得到质粒呢？

质粒一般存在于细菌等生物的细胞质中，是一类具有自主复制能力并能表达目的基因的载体；实验中我们要表达的目的基因五花八门，比如人类基因，鼠源基因，荧光报告基因等等，我们可以直接找实验室的师兄师姐，看他们用的什么载体，或者查看文献上用什么载体，然后根据上面提供的信息，通过构建载体的方式表达出我所需要的蛋白；

此处必不可少的要提到伟大的基因工程技术--质粒载体构建，载体构建是分子生物学研究常用的手段之一，主要包括已有载体多克隆位点MCS的改造和已有载体启动子、增强子、筛选标记等功能元件的改造。

以下是载体构建的基本步骤：

1.获取目的基因片段

通过现有质粒模板、DNA及CDNA模板PCR 扩增得到所需的目的基因片段或者直接使用全基因合成的方式合成我所需要的目的序列（目的片段上带有载体的同源臂序列）。

2.选择合适的质粒

根据实验目的和要求选择合适的质粒载体，比如你的质粒要用于包装慢病毒，可能需要用到慢病毒质粒载体；如果需要做瞬转，普通过表达载体就可以啦；有时候还会用到有乳糖操纵子的载体。

3.酶切

用合适的限制性内切酶（一般在MCS区选择）对载体质粒进行酶切，以产生匹配的粘性末端（此处一般不考虑平末端内切酶）。

4.纯化

对第一步的目的序列及第三步酶切后的载体质粒进行纯化，去除酶切反应中的其他成分。

5.连接

在重组酶的作用下，纯化后的目的基因片段与质粒载体进行连接，形成重组质粒。

6.转化

将连接产物转化到感受态细胞中，使重组质粒进入细胞内（实验室常用的感受态细胞有Stbl3、DH5a、TOP10等）。

7.筛选阳性克隆

通过抗性筛选或其他筛选方法，挑取含有重组质粒的阳性克隆。

8.鉴定

对筛选出的阳性克隆进行进一步的鉴定，如酶切鉴定、测序鉴定等，以确保目的基因正确插入到质粒载体中。

补充说明：如何判断质粒载体构建中，酶切反应是否成功？

1.琼脂糖凝胶电泳：将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳。如果酶切成功，会观察到预期大小的片段。

2.酶切前后分子量对比：通过对比酶切前后质粒的分子量理论值与实际电泳结果进行判断。

3.单一条带：如果是单酶切，应出现一条与预期大小相符的条带，且条带比较清晰锐利，无明显拖带或者涂抹带；如果是双酶切，有时会出现两条或更多条符合预期大小的条带。

4.对照比较：与设置的阴性对照（即原质粒）的电泳结果进行比较分析，与阴性对照相比，条带位置和形态应该发生明显变化。