载体构建的优化经验

启动子名称

用途

描述

表达模式

备注与说明

CMV

常规表达

人类巨细胞病毒的强启动子

组成型

可能因表观遗传沉默而失活

EF1A

常规表达

人类延伸因子1α的强启动子

组成型

表达水平十分稳定，与细胞增殖状态相关

SV40

常规表达

猿猴病毒40的早期启动子

组成型

可能因表观遗传沉默而失活

PGK1 (人/小鼠)

常规表达

磷酸甘油酸激酶1基因的启动子

组成型

广泛表达，但不能提供最高表达水平

U6

常规表达

人类U6核小RNA基因的启动子

组成型

属于RNA聚合酶III启动子，用于表达小RNA

human beta actin

常规表达

β-肌动蛋白基因的强启动子

组成型

功能强，但表达水平可能因细胞类型而异

CAG

常规表达

复合型强启动子（CMV早期增强子+鸡β-肌动蛋白启动子）

组成型

无处不在的强表达

TRE

诱导表达

四环素反应元件

四环素/多西环素诱导

Tet-On/Off诱导系统的组成部分

UAS

诱导表达

上游激活序列（来自酵母）

特异性

需要GAL4转录因子激活

Ac5

常规表达

黑腹果蝇Actin 5C基因的启动子

组成型

果蝇和其他双翅目昆虫中的强启动子

Polyhedrin

常规表达

杆状病毒的极晚期启动子

组成型（在病毒感染晚期）

用于杆状病毒-昆虫细胞表达系统

CaMKIIa

特异性表达

钙/钙调蛋白依赖的蛋白激酶IIα的启动子

特异性（主要在神经元）

用于特异性在前脑神经元中表达

GAL1/10

诱导表达

酵母双向启动子

半乳糖诱导

可双向表达基因。受GAL4调控，被半乳糖诱导

TEF1

常规表达

酵母翻译延伸因子启动子

组成型

与哺乳动物EF1α启动子功能类似

GPD

常规表达

酵母甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子

组成型

强组成型启动子，常用于酵母表达系统

ADH1

常规表达

酵母醇脱氢酶启动子

受乙醇影响

全长启动子较强，但受碳源调控。ADH1启动子是组成型，受葡萄糖抑制

CaMV35S

常规表达

花椰菜花叶病毒35S启动子

组成型

在双子叶植物和某些单子叶植物中具有强活性，是植物中最常用的启动子

Ubi

常规表达

玉米泛素基因启动子

组成型

在植物中实现组成型表达

H1

小RNA表达

人类RNA聚合酶III启动子

组成型

与U6启动子类似，在多种细胞类型中表现良好

U6

小RNA表达

人类U6 snRNA启动子

组成型

小鼠和人类U6启动子都常用，属于Pol III启动子

T7

体外转录/原核表达

T7噬菌体来源的启动子

体外转录或需要T7 RNA聚合酶

当用于体外转录时效率很高；在原核表达中需要含有T7 RNA聚合酶的菌株(如BL21(DE3))

T7lac

原核表达

受lac操纵子调控的T7启动子

IPTG诱导

在T7基础上加入lac操纵子，本底表达更低，调控更严谨

SP6

体外转录

SP6噬菌体来源的启动子

体外转录

当用于体外转录时，需要SP6 RNA聚合酶

araBAD

原核表达

阿拉伯糖操纵子启动子

阿拉伯糖诱导

受AraC蛋白调控，调控范围广，本底低

Trp

原核表达

色氨酸操纵子启动子

色氨酸缺乏时诱导

在色氨酸匮乏时被激活

lac

原核表达

乳糖操纵子启动子

IPTG诱导

最早使用的诱导型启动子，但本底较高。现代载体通常使用lacIq等突变来提高调控严谨性

tac

原核表达

trp和lac启动子的杂合启动子

IPTG诱导

比lac启动子更强，但仍受lac操纵子调控

pl

原核表达

λ噬菌体左向启动子

温度敏感型

通常与温度敏感的cI857阻遏蛋白配合使用，通过温度变化(30°C→42°C)诱导