哺乳细胞双荧光素酶报告质粒介绍

一、推荐质粒：
pmirGLO载体：报告基因是Fluc，内参基因是Rluc，具体信息见http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0198.html

psiCHECK-2载体：报告基因是Rluc，内参基因是Fluc，具体信息见http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0197.html

二、基本应用：

1、启动子结构分析：将启动子区域的序列进行分段截短，或者对特定位点进行突变，再分别构建到报告载体，检测启动子的活性。

2、验证特定转录因子同其调控作用：将调控序列插入到报告载体中，同时共转过表达转录因子，通过分析荧光素酶的表达反映转录因子过表达是否影响基因的表达。

3、验证microRNA靶向调控序列：将待验证序列插入报告基因载体的3’UTR区域，再共转microRNA；如果荧光素酶表达下降，则待验证序列就是microRNA靶序列。

4、验证信号通路中的转录因子：将该信号通路的下游相应原件序列构建入报告基因载体，检测不同上游条件下，其荧光素酶活性，即下游信号通路的响应情况。