JAK-STAT信号传导通路技术总结

2026-05-13 小编技术资料 23 浏览

JAK酪氨酸蛋白激酶-信号传导和转录激活因子(janus kinase-signal transducers and activators oftranscription, JAK-STAT)。许多细胞因子包括白介素、干扰素、粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子、红细胞生成素以及促血小板生成素等均通过该信号通路传导信号。JAK-STAT主要参与细胞增殖、分化、凋亡、免疫调节以及肿瘤生成等生物学过程。

一、酪氨酸激酶（JAK）

JAK是一种酪氨酸激酶，既能磷酸化与其结合的细胞因子受体，又能磷酸化含特定SH2结构域的信号分子。JAK蛋白家族共包括4个成员：JAK1、JAK2、JAK3以及Tyk2，其中, AK1、JAK2和Tyk2存在于多种组织细胞中，JAK3仅见于白细胞中；它们在结构上有7个JAK同源结构域（JAK homology domain, JH），其中JH1结构域（激酶区）和JH2结构域（“假”激酶区）主要起催化作用，JH3~JH7的N端同源区域是受体结合区域。

二、信号转导和转录活因子（STAT）

STAT是一类胞质蛋白，可与靶基因结合，是JAK的下游底物。STAT包括7个成员：STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5a、STAT5b和STAT6, 一般具有750-850个氨基酸。具有6个结构域: C-端转录活化结构域,决定STAT的核转位，调控转录反应；DNA结合结构域，识别并结合靶基因调控区DNA；SH2结构域,负责STAT与受体分子的结合以及STAT形成二聚体；连接结构域, 螺旋-螺旋结构域(coiled-coil结构域)；N-末端结构域可与其他转录因子结合形成二聚体。

三、信号转导通路的激活

细胞因子与其相应的受体结合后诱导受体发生二聚化，从而激活与受体相结合的JAK激酶, 进而磷酸化受体上的酪氨酸位点, 使其产生与STATs结合的区域。结合后的STATs最终在C端大概700个氨基酸的位点被JAK磷酸化。磷酸化的STATs蛋白通过SH2结构域形成二聚体, 进而转入细胞核, 与靶基因DNA调控区域结合, 最终发挥信号传导作用。

四、构建相关质粒

1、表达转录因子STAT的质粒

① pCDNA3.1-HA-STAT1-Myc： http://www.miaolingbio.com/plasmid/P4263.html
② pCDNA3.1-HA-STAT2-Myc：http://www.miaolingbio.com/plasmid/P4105.html
③ pCDNA3.1-STAT3(human)：http://www.miaolingbio.com/plasmid/P4105.html
④ pECMV-3×FLAG-STAT5a：http://www.miaolingbio.com/plasmid/P4105.html
⑤ pECMV-STAT4-3×FLAG（可以构建）
⑥ pECMV-STAT5b-3×FLAG（可以构建）
⑦ pECMV-STAT6-3×FLAG（可以构建）

2、报告基因质粒

① pStat3-TA-Luc：http://www.miaolingbio.com/plasmid/P0698.html
pSTAT3-GFP：http://www.miaolingbio.com/plasmid/P14576.html
② pGL4.52[Luc2P STAT5 RE Hygro]：http://www.miaolingbio.com/plasmid/P3139.html
③ pStat1-TA-Luc（可以构建）
④ pStat2-TA-Luc（可以构建）
⑤ pStat4-TA-Luc（可以构建）
⑥ pStat6-TA-Luc（可以构建）

3、表达酪氨酸激酶JAK的质粒

① pCDNA3.1-JAK1-Myc：http://www.miaolingbio.com/plasmid/P8653.html
② pCDNA3.1-TYK2-Myc：http://www.miaolingbio.com/plasmid/P8429.html
③ pECMV-JAK2-3×FLAG（可以构建）
④ pECMV-JAK3-3×FLAG（可以构建）

4、表达通过JAK-STAT途径传导信号的细胞因子的质粒

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JAK-STAT信号传导通路技术总结

一、 酪氨酸激酶（JAK）

二、 信号转导和转录活因子（STAT）

三、 信号转导通路的激活

四、 构建相关质粒